Nouvo Twous Deteksyon Asid Nukleik Coronavirus(SARS-Cov-2).
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluminrèscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Produkt name 】Nouvo Coronavirus (SARS-Cov-2) Twous Deteksyon Asid Nukleik (Metòd Sond RT-PCR Fluoresan)
【Packaging specifications 】25 Tès / Twous
【Intended uslaj】
Yo itilize twous sa a pou deteksyon kalitatif asid nikleyik ki soti nan nouvo kowonaviris nan prelèvman nazofarinj, prelèvman orofarinj (gòj), prelèvman nan nen anteryè, prelèvman mid-turbinate, lave nan nen ak aspirasyon nan nen ki soti nan moun ki sispèk nan COVID19 pa founisè swen sante yo. Yo ka itilize deteksyon ORF1ab ak jèn N nouvo kowonaviris yo pou dyagnostik oksilyè ak siveyans epidemyolojik nouvo enfeksyon kowonaviris yo.
【Principles of the prosedure 】
Twous sa a fèt pou sond TaqMan espesifik ak primè espesifik ki fèt pou nouvo coronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab ak sekans jèn N. Solisyon reyaksyon PCR la gen 3 seri primè espesifik ak sond fliyoresan pou deteksyon espesifik nan sib, epi yo itilize yon seri adisyonèl primè espesifik ak sond fliyoresan kòm kontwòl estanda entèn twous la pou detekte jèn endojèn nan kay la.
Prensip tès la se ke pwofonde espesifik fliyoresan an dijere ak degrade pa aktivite eksonukleaz anzim Taq nan reyaksyon PCR la, pou gwoup fluorescent repòtè a ak gwoup fliyoresan etenn yo separe, pou sistèm siveyans fliyoresan an ka resevwa yon fliyoresan. siyal, ak Lè sa a, Atravè efè a anrichisman nan anplifikasyon PCR, siyal la fliyoresan nan pwofonde a rive nan yon valè papòt mete-Ct valè (Sik papòt). Nan ka pa gen okenn anplikon sib, gwoup repòtè ankèt la se tou pre gwoup la trempe. Nan moman sa a, transfè enèji sonorite fluoresans la rive, ak fliyoresans gwoup repòtè a se pa gwoup trempe a, pou siyal fliyoresan an pa ka detekte pa enstriman PCR fliyoresan an.
Yo nan lòd yo kontwole itilizasyon reyaktif pandan tès la, twous la ekipe ak kontwòl pozitif ak negatif: kontwòl pozitif la gen plasmid recombinant sit sib la, ak kontwòl negatif la se dlo distile, ki itilize pou kontwole polisyon nan anviwònman an. Li rekòmande yo mete yon kontwòl pozitif ak yon kontwòl negatif ansanm lè tès la.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Components | |
| None | Speciifikasyon | Quantity | Quantity | |
| Kontwòl pozitif | 180 μL / flakon | 1 | 1 | Plasmid konstwi atifisyèlman, dlo distile |
| Kontwòl negatif | 180 μL / flakon | 1 | 1 | Dlo distile |
| Melanj SARS-Cov-2 | 358.5 μL / flakon | 1 | / | Pè Jadendanfan espesifik, sond fliyoresan deteksyon espesifik, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, dlo distile, elatriye |
| Melanj anzim | 16.5 μL / flakon | 1 | / | Taq anzim, transkriptaz ranvèse, anzim UNG, elatriye. |
| Melanj SARS-Cov-2 (lyofilize) | 25 tès / flakon | / | 1 | Pè Jadendanfan espesifik, sond fliyoresan deteksyon espesifik, dNTPs, anzim Taq, transkriptaz ranvèse, dlo distile, elatriye. |
| 2x tanpon | 375 μL / flakon | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, dlo distile, elatriye. |
Remak：(1) Konpozan yo nan diferan twous pakèt pa ka melanje oswa chanje.
(2) Prepare pwòp reyaktif ou: twous ekstraksyon asid nikleik.
【Storage conditions epi expiration date 】
For BST-SARS-25:Transpò ak magazen nan -20±5 ℃ pou yon tan long.
For BST-SARS-DR-25:Transpò nan tanperati chanm. Sere nan -20±5 ℃ pou yon tan long.
Evite repete sik friz-dekonjle. Peryòd validite a pwovizwaman fikse pou 12 mwa.
Gade etikèt la pou dat fabrikasyon ak itilizasyon.
Apre premye ouvèti a, reyaktif la ka estoke nan -20±5 ° C pou pa plis pase 1 mwa oswa jiska fen peryòd reyaktif la, kèlkeswa dat ki vini an premye, pou fè pou evite sik friz-dekonjle repete, ak kantite friz reyaktif la. -sik dekonjle pa ta dwe depase 6 fwa.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
Kalite echantiyon 1.Applicable: Ekstrè solisyon asid nikleyik.
2.Sample depo ak transpò: Sere nan-20±5 ℃ pou 6 mwa.Freeze epi dekonjle echantiyon yo pa plis pase 6 fwa.
【Testing method】
1.Nucleic acid extraction
Chwazi yon twous ki apwopriye pou fè ekstraksyon asid nikleyik pou ekstrè asid nikleik viral, epi swiv enstriksyon pou twous ki koresponn yo. Li rekòmande pou itilize yon twous pou fè ekstraksyon ak pirifikasyon asid nikleik ki te pwodwi pa Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. oswa twous pou pirifye asid nikleik ekivalan.
2. Reaction reajnt preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Retire Melanj SARS-Cov-2 ak Melanj Anzim, konplètman fonn nan melanj tanperati chanm nan byen avèk aparèy Vortex epi answit santrifuje yon ti tan.
(2) Yo te ajoute 16.5uL Melanj Anzim nan 358.5uL Melanj SARS-Cov-2 epi yo te melanje byen pou jwenn solisyon reyaksyon melanje a.
(3) Prepare yon tib octal PCR pwòp 0.2 mL epi make li ak 15uL solisyon reyaksyon melanje pi wo a pou chak pi.
(4) Ajoute 15 μL solisyon asid nikleyik pirifye, kontwòl pozitif ak kontwòl negatif, epi ak anpil atansyon kouvri bouchon tib octal la.
(5) Melanje byen pa ranvèse tèt anba, epi byen vit santrifije pou konsantre likid la nan pati anba tib la.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) Ajoute 375ul 2x tanpon nan melanj SARS-Cov-2 ((lyofilize) pou prepare melanj reyaksyon an. Melanje byen pa pipete epi answit santrifuje yon ti tan. （Yon fwa yo prepare melanj reyaksyon, li rekòmande pou estoke nan -20 ℃ nan depo alontèm.）
(2) Prepare yon tib octal PCR pwòp 0.2 mL epi make li ak 15μL melanj reyaksyon pou chak pi.
(3) Ajoute 15μL solisyon asid nikleyik pirifye, kontwòl pozitif ak kontwòl negatif, epi ak anpil atansyon kouvri bouchon tib octal la.
(4) Melanje byen pa ranvèse tèt anba, epi byen vit santrifije pou konsantre likid la nan pati anba tib la.
3. PCR amplification （Tanpri gade manyèl enstriman an pou anviwònman operasyon yo.）
3. 1 Mete PCR 8-tib la nan chanm echantiyon an nan enstriman an PCR fluorescent, epi mete echantiyon an yo dwe teste, kontwòl la pozitif ak kontwòl negatif la dapre lòd la nan loading.
3.2 Chanèl deteksyon fliyoresans:
(1) ORF1ab jèn chwazi kanal deteksyon FAM (Reporter: FAM, Quencher: Okenn).
(2) N jèn chwazi kanal deteksyon VIC (Reporter: VIC, Quencher: Okenn).
(3) Jenn estanda entèn chwazi kanal deteksyon CY5 (Reporter: CY5, Quencher: Okenn).
(4) Referans pasif la mete sou ROX.
3.3 Anviwònman paramèt pwogram PCR:
| Etap | Tanperati (℃) | Tan | Kantite sik | |
| 1 | Reyaksyon transcription ranvèse | 50 | 15 min | 1 |
| 2 | Aktivasyon anzim Taq | 95 | 2.5 min | 1 |
| 3 | Aktivasyon anzim Taq | 93 | 10 s | 43 |
| Recuit ekstansyon ak akizisyon fluoresans | 55 | 30 s | ||
Apre mete, sove fichye a epi kouri pwogram reyaksyon an..
4.Results analysis
Apre pwogram nan fini, rezilta yo otomatikman sove, epi yo analize koub anplifikasyon an. Koub anplifikasyon an mete sou papòt default enstriman an.
【Explanation of test results 】
1. Detèmine validite eksperyans lan: kontwòl pozitif FAM, VIC chanèl la ta dwe gen yon koub anplifikasyon tipik, ak valè Ct jeneralman mwens pase 34, men li ka varye akòz anviwònman papòt diferan nan enstriman diferan. Kontwòl negatif FAM, VIC chanèl yo ta dwe ki pa anplifye Ct. Li dakò ke kondisyon ki anwo yo dwe satisfè an menm tan an, otreman tès sa a pa valab.
2. Jijman rezilta
| Chanèl FAM/VIC | Rezilta jijman |
| Ct＜37 | Egzanp tès la pozitif |
| 37≤Ct<40 | Koub anplifikasyon an gen fòm S, ak echantiyon sispèk yo bezwen re-egzamine; si rezilta re-egzamen yo konsistan, yo jije li kòm pozitif, otreman li negatif |
| Ct≥40 Oswa pa gen anplifikasyon | Egzanp tès la negatif (oswa anba limit ki pi ba nan deteksyon twous) |
Remak: (1) Si tou de chanèl FAM ak chanèl VIC pozitif an menm tan, yo detèmine SARS-Cov-2 a pozitif.
(2) Si chanèl FAM oswa chanèl VIC pozitif epi lòt chanèl negatif, tès la ta dwe repete. Si li pozitif an menm tan, yo pral jije li kòm SARS-Cov-2 pozitif, sinon li pral jije kòm SARS-Cov-2 negatif.
Pwodwi ki gen rapò
-
Kit deteksyon antikò COVID-19 IgM/IgG
Kit deteksyon antikò COVID-19 IgM/IgG （Metòd imunokromatografi lò koloidal) Manyèl pwodwi 【NON PWODWI】 Twous deteksyon antikò COVID- 19 IgM/IgG （Metòd imunokromatografi lò koloidal) 【PACKAGING Tès 【ESPESIFIKASYON 【10 / Egzamen REZIME】 Nouvo coronavirus yo fè pati genus β. COVID-19 se yon maladi enfektye respiratwa egi. Moun yo jeneralman sansib. Kounye a, pasyan yo ki enfekte pa nouvo coronavirus la se sous prensipal la ...
-
Ekstraksyon asid nikleik oswa twous pou pirifye
Ekstraksyon asid nikleik oswa twous pou pirifye oswa estoke nan -20 ℃. Yo ta dwe transpòte echantiyon an lè l sèvi avèk boukle 0 ℃. Entwodiksyon Ekstraksyon asid nikleik oswa twous pou pirifye (metòd pèl mayetik) fèt pou pirifikasyon otomatik RNA ak ADN soti nan likid kò (tankou prelèvman, plasma, serom) lè l sèvi avèk enstriman ekstraksyon otomatik asid nikleyik. Teknoloji mayetik-patikil bay bon jan kalite ADN / RNA ki apwopriye pou ...
-
Twous tès antijèn SARS-CoV-2 （Immunochromatogr...
SARS-CoV-2 Antigen Assay Twous (Metòd Imunokromatografi) Manyèl Pwodwi 【NON PWODWI】SARS-CoV-2 Antigen Assay Twous (Metòd Imunokromatografi) 【SPECIFICATIONS PACKAGING】 1 Tès/Tout 【RESÈT】 genus nan nouvo coronavirus β. COVID-19 se yon maladi enfektye respiratwa egi. Moun yo jeneralman sansib. Kounye a, pasyan ki enfekte pa nouvo coronavirus la se prensipal...
-
Twous Test antijèn SARS-CoV-2
SARS-CoV-2 Antigen Assay Twous (Metòd Imunokromatografi) Manyèl Pwodwi 【NON PWODWI】SARS-CoV-2 Antigen Assay Twous （Imunochromatography Metòd) 【SPECIFICATIONS PACKAGING】 1 Tès/Tout, 25 Tès/Tout】 STRITAB, 1K00】 nouvo coronavirus yo fè pati genus β. COVID-19 se yon maladi enfektye respiratwa egi. Moun yo jeneralman sansib. Kounye a, pasyan ki enfekte pa nouvo coronavirus la se sous prensipal enfeksyon; moun ki enfekte san sentòm...